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注射進(jìn)樣量/注射進(jìn)樣體積

    樣品質(zhì)量或體積過載和使用錯(cuò)誤的樣品溶劑都會造成色譜柱性能的顯著降低，由此損害分離效果。注射進(jìn)樣體積不得超過流速的10%（比如，在流速為1毫升/分鐘時(shí)，注射進(jìn)樣體積<100微升）。樣品進(jìn)樣量高出吸附等溫線的線性部分就意味著上樣量過載。這條分界線不一而足，原則上，每毫升柱體積上不得承載超過0.01毫克的樣品（比如，在4.6 X 250 毫米色譜柱上zui大上樣量為22微克）。如果因?yàn)闄z測精度需要，上樣量還是可以再上調(diào)。樣品溶劑內(nèi)的強(qiáng)移動(dòng)相組分（反相模式下脂肪醇、乙腈，或者正相模式下脂肪醇、乙酸乙酯等）含量不得超過它們在工作移動(dòng)相中的濃度。

額外柱體積/死體積

    塔板數(shù)低下的原因通常是因?yàn)樗荔w積過大。死體積是一下這些部分工作體積的總和，樣品注射器，包括樣品環(huán)，連接注射器和色譜柱的導(dǎo)管，連接色譜柱和貫流分析池的導(dǎo)管，貫流分析池，再加上配件、接頭和線程內(nèi)濾膜所產(chǎn)生的空間。內(nèi)徑為0.010”的導(dǎo)管在液相色譜系統(tǒng)中zui常見。如果使用鉆孔更細(xì)（內(nèi)徑<3.0毫米）的色譜柱，可以將內(nèi)徑為0.010”的導(dǎo)管更換成內(nèi)徑為0.007”的導(dǎo)管以減少死體積，從而提高色譜性能。使用內(nèi)徑為0.005”的導(dǎo)管可以進(jìn)一步減少死體積，但就是操作上不太方便。使用內(nèi)徑小于0.007”的導(dǎo)管對流速有所限制，當(dāng)緩沖鹽分沉淀析出時(shí)會帶來麻煩。如果您正使用多種品牌的液相色譜柱，請確認(rèn)用以連接色譜柱的配件是否剛好配套。如果您的色譜系統(tǒng)使用的是不銹鋼導(dǎo)管和配件，在連接色譜柱前，請?jiān)诤藢ιV柱的品牌后選擇正確的配件并預(yù)先裝配好。如果您的色譜系統(tǒng)使用的是聚醚醚酮材料的導(dǎo)管和配件，比較理想的方式是在每次更換色譜柱的時(shí)候，選擇在新切下的聚醚醚酮導(dǎo)管上安裝全新的聚醚醚酮配件，以確保它們之間匹配。